Compartir en papel|Utilización del analizador de curva de crecimiento microbiano para el monitoreo automatizado de la curva de crecimiento de Streptococcus iniae
Apr 15, 2025
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En agosto de 2022, se produjo un evento de mortalidad a gran escala de bagre amarillo en una granja de peces en la ciudad de Yichang, provincia de Hubei. Los investigadores aislaron una bacteria patógena del bagre amarillo enfermo. A través de caracterizaciones morfológicas, fisiológicas y bioquímicas, la secuenciación del gen 16S rRNA y el análisis filogenético, la bacteria se identificó como Streptococcus iniae.
Al realizar la secuenciación del genoma completo de esta cepa Streptococcus iniae, los investigadores determinaron que albergaba un cromosoma circular con una longitud de 1,776,777 pb y un contenido de GC de 37.14%. El análisis de secuencia del genoma reveló que esta cepa bacteriana contenía 204 genes relacionados con la virulencia y 127 genes de resistencia antibiótica. Otros experimentos demostraron que esta cepa de Streptococcus iniae era altamente patógena, con una dosis letal media (LD50) de 9.53 × 10⁵ CFU/g. Los exámenes histopatológicos indicaron que, después de la infección con esta cepa, múltiples órganos del bagre amarillo, incluida la piel, las branquias, las aletas, el bazo, el hígado, los riñones, los intestinos, los ojos y el cerebro, exhibieron una degeneración celular extensa, necrosis, hemorragia y respuestas inflamatorias.
Después de la infección, las actividades de enzimas inmunes innatas como la fosfatasa ácida y la fosfatasa alcalina en el suero de bagre amarillo aumentaron significativamente a las 24 y 48 horas después de la infección, y luego disminuyeron a las 168 horas. Además, el equipo de investigación detectó la transcripción de genes inmunes relacionados con el bagre amarillo en diferentes puntos de tiempo después de la infección. Descubrieron que los niveles de transcripción de estos genes estaban significativamente regulados al alza, lo que sugiere que el sistema inmunitario del huésped desempeñaba un papel crucial en la resistencia a la infección por S. iniae.
Este estudio no solo dilucidó que S. iniae fue la causa directa de la muerte a gran escala del bagre amarillo, sino que también mejoró la comprensión del mecanismo patogénico de la invasión de S. iniae y el sistema de defensa del huésped. Proporcionó una base teórica importante para los esfuerzos posteriores de prevención y control de enfermedades.
Aplicación de la serie MGC Analizador de curva de crecimiento microbiano
Para obtener una mejor comprensión de las características de crecimiento de S. iniae, el equipo de investigación empleó el analizador de curva de crecimiento microbiano de la serie MGC MGC - 200 para la detección automatizada de la curva de crecimiento.
S. iniae se cultivó en medio BHI hasta la densidad óptica a 6 0 0 nm (OD6 0 0) alcanzó 1. 0. Posteriormente, la suspensión bacteriana se inoculó en medios BHI con diferentes valores de pH (5.5, 6. 0, 6.5, 7. 0, 7.5, 8. 0, y 8.5) y diferentes concentraciones de NaCl (0.5%, 1.0%, 1.5%, 2.0%, 2.5%y 3.0%) de 1: concentraciones de 1. Los medios inoculados se cultivaron en placas de pozos 96 - (200 μl por pozo), y el OD600 se midió cada 2 horas durante un total de 60 horas.

Como se muestra en la Figura A, el Streptococcus dolphinus aislado crece mejor entre el pH 6.5 y 7.5, con el pH óptimo alrededor de 7. Cuando el pH es 6. 0, el período de histéresis del crecimiento bacteriano se prolonga, cuando el pH es 5.5, el período de la histéresis de crecimiento bacteriano se prolonga significativamente y cuando el pH es 8.5, el crecimiento bacteriano es un crecimiento bacteriano.

Como se muestra en la Figura B, el Streptococcus dolphinus aislado puede crecer normalmente a {{0}}. 5-1. 5% de concentración de NaCl, y la concentración óptima de NaCl es 1. 0. Cuando la concentración de NaCl alcanza el 2. 0%, el período de histéresis del crecimiento bacteriano se prolonga significativamente, y cuando la concentración de NaCl alcanza el 3.0%, el crecimiento bacteriano se detiene.
Conclusión
El analizador de curva de crecimiento microbiano de la serie MGC tiene las funciones del monitoreo del entorno de gas, el cultivo de alto rendimiento, la detección totalmente automática y la exhibición en tiempo real de curvas de crecimiento. Todo el proceso no requiere muestreo manual frecuente o personal de servicio, lo que reduce en gran medida el riesgo de contaminación, realmente se da cuenta de la liberación de la mano de obra y la mejora de la eficiencia de la investigación, y se convertirá en su hombre derecho en el camino de la investigación científica.
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