Pasos experimentales para levadura rota

Jul 15, 2019

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Materiales experimentales: levadura, tampón fosfato de sorbitol (Na2HPO4: NaH2PO4 = 77.4: 22.6), enzima de caracol y celulasa.


Procedimiento experimental: se tomaron 2 ml de solución bacteriana en un tubo de recolección de 2,5 ml, se centrifugaron a 12000 r / min durante 1 minuto, se descartó el sobrenadante y se repitió el procedimiento una vez. Resuspender las células agregando 1 ml de tampón al tubo de centrífuga y luego tomar 20 ul de la solución bacteriana. Observe la morfología de la pared celular inicial de las células de levadura con un microscopio óptico y luego coloque la solución de enzima (enzima de caracol: celulasa = 50: 10 ul). Baño de agua en un baño de agua a 37 grados durante 1 h (durante el período para evitar la precipitación de bacterias, el tubo de centrifugación se puede agitar regularmente)


Después de completar el baño de agua, se tomaron 20 ul de líquido bacteriano en un tubo de centrífuga para observar los cambios morfológicos de la pared celular y la membrana celular de la célula de levadura bajo un microscopio óptico, y luego se usó el pulverizador de células ultrasónico para romper El líquido bacteriano en el tubo de la centrífuga y el procedimiento específico se ajustaron a la potencia. 300w, tiempo de trabajo 10min, ultrasonido abierto 3S, ultrasónico apagado 3S, temperatura de alarma 70 grados, los parámetros específicos se pueden ajustar según la situación real, después del ultrasonido para tomar el líquido bacteriano para hacer la última pieza, tomar 20ul de líquido de bacterias bajo el microscopio óptico para observar la pared celular de la levadura y los cambios morfológicos en la membrana celular.


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