Principio de la tecnología de instrumentos de PCR

La sonda Taqman marcada con fluoresceína se mezcla con el ADN plantilla para completar el ciclo térmico de desnaturalización a alta temperatura, renaturalización a baja temperatura, extensión a temperatura moderada y se sigue la regla de reacción en cadena de la polimerasa. La sonda Taqman complementaria a la plantilla de ADN está escindida y es fluorescente. El pigmento está libre en el sistema de reacción y emite fluorescencia bajo fotoexcitación específica. A medida que aumenta el número de ciclos, el fragmento del gen diana amplificado crece exponencialmente, y la intensidad de la señal de fluorescencia cambia con la amplificación medida por la detección en tiempo real. El valor de CT se obtiene, y al mismo tiempo, utilizando una pluralidad de estándares de concentraciones de plantilla conocidas como control, se puede obtener el número de copias del gen de la muestra a analizar.